Carlisle naquit vers l'année 1640 à Londres, juste avant l'avènement de Cromwell. Son père, pasteur anglican fervent voire fanatique, pourchasse des démons tels que loup-garous, sorcières et autres vampires, mais faisant plus de victimes innocentes que de vraies "prises". En 1663, son père vieillissant, celui-ci enjoint Carlisle de prendre sa relève dans sa quête contre le Mal. Assumant sans conviction son rôle, il tombe sur un vrai nid de vampires dans les égouts de la ville. Aidé par la vindicte populaire, Carlisle poursuit un vampire affamé qui parvient à tuer deux de ses attaquants, à blesser sérieusement Carlisle et à enlever un quatrième. Pendant que la foule pourchasse la bête, Carlisle parvient à ramper dans une ruelle pour se cacher connaissant son sort, s'il est découvert.
Il est l'époux d'Esmée Cullen, le père adoptif d'Edward Cullen, de Rosalie Hale, d'Emmett Cullen, d'Alice Cullen et de Jasper Hale et considère sa belle-fille Bella Swan comme l'un de ses enfants. Il est médecin et exerce sa profession dans la petite ville de St Gabriel.
Il joue un rôle très important dans la famille. Lorsqu'un de ses membres a besoin de conseils, Carlisle est le premier sollicité. Il est pourtant très influencé par son épouse.

Elle est devenue vampire grâce à Carlisle Cullen. Effectivement, Esmée avait été mariée à un homme par sa famille. Cet homme devint violent, et elle se rendit compte qu'elle était enceinte de lui. Ne voulant pas que son enfant ne vive dans ces conditions, elle partit toute seule. Un an après avoir accouché, son bébé mourut. Anéantie, elle sauta d'une falaise. Elle fut repêchée, et, tout le monde la croyant morte, fut envoyée à la morgue. Seulement, Carlisle Cullen entendit son coeur et sut qu'elle était encore vivante. Il la transforma puisqu'elle était en train de mourir. Et depuis ce jour, ils sont ensemble et vivent avec leurs enfants adoptifs. Elle est très protectrice envers ses "enfants" et les calme souvent. Carlisle est très influencé par sa femme et lui demande son avis avant de prendre une décision. Elle supporte très mal être séparée du reste de la famille. Esmée accueille très vite Bella dans la famille, la voyant comme le bonheur d'Edward et très vite elle considéra Bella comme un de ses "enfants". Dans le second tome, elle est très triste de l'éloignement d'Edward.

Elle aime entendre Edward jouer du piano et composer. Elle déteste la violence et refuse de se battre. Elle s'interpose souvent durant les conflits de ses "enfants".

Né le 20 juin 1901 a Chicago,aux etats unis.Sa vie en tant qu'humain fut de courte durée, puisqu'il mourut en 1918 a l'age de dix sept ans.

En 1918 la grippe espagnol ravage le pays,emportant ses parents, Edward se retrouve seul et très malade. Carlisle Cullen faisait alors partie du personnel hospitalier dans l'hôpital où se trouvait la famille Masen. C'est après la mort des parents d'Edward que Carlisle le découvrit, il fut tout de suite émerveillé par la beauté du jeune malade, ayant promit à sa mère avant qu'elle ne meure de tout faire pour le sauver, il décida dans un dernier recours de le faire passer pour mort afin de le transformer.